氢醌诱导C57BL/6小鼠白发模型构建

白发疾病,是一种头发白为特征,而无其他症状的毛发病。白发的产生,受到黑色素与色素生成、氧化应激、毛囊衰老、遗传因素和染色体稳定性等因素影响较大。此外,非疾病因素(营养不良、精神压力过大、长期繁重脑力劳动、精神性疲劳、精神创伤、悲观、失助和忧虑情绪等),也可能导致白发疾病的发生。

现有的白发动物模型,一般通过紫外线照射、化学物质暴露、精神压力和营养状况等方法,来影响黑色素细胞的活性和数量或黑色素的合成过程,从而促进头发变白。通过建立小鼠白发模型,有利于研究白发的疾病机理,从而开发针对白发的治疗和预防药物。

通过查阅文献,可以通过氢醌和卡博替尼(Cabozantinib)药物处理刺激小鼠,建立小鼠白发模型。

  1. 使用氢醌建立小鼠白发模型[1]

    (1)选取C57BL/6小鼠,SPF级别,雄性,体重20g左右。

    (2)4%水合氯醛(0.18ml/20g),腹腔注射麻醉小鼠,麻醉状态下使用剃刀剃除1×2cm2的背部毛发。使用脱毛膏,去除剃毛部位剩余细毛。

    (3)按体重小鼠分成4组,每组5只,分别为对照组1、对照组2、外用氢醌组、皮下氢醌组。

    (4)使用生理盐水制备1.5%和2.5%的氢醌。

    (5)小鼠脱毛7天后,开始造模,造模方法和剂量如下表所示

    组别造模方式试剂使用量ml/只频率
    对照组1生理盐水皮下注射0.22天1次
    对照组2生理盐水外涂1.02天1次
    皮下氢醌组1.5%氢醌皮下注射0.22天1次
    外用氢醌组2.5%氢醌外涂1.02天1次

    (6)后续观察发现,第17天氢醌组开始生白毛,第30天的实验结果如下图所示。

     

    实验结果:通过照片和毛色恢复平分发现,造模第一天各组无差异,实验起点相同。至第30天时,对照组毛发正常恢复,而皮下氢醌组比外涂氢醌组更白,说明皮下效果更佳,但会造成不可逆白发,影响受试药的筛选。

    结论:氢醌皮下注射组小鼠皮下注射后脱色过度,无法恢复黑色,因此选择外涂氢醌为最佳白发动物模型。

  2. 卡博替尼(Cabozantinib)建立小鼠白发模型

    卡博替尼(Cabozantinib)是一款广谱、多靶点抗肿瘤药物,作为VEGFR2抑制剂使用,可起到诱导小鼠白发模型。[2]

    (1)Cabozantinib使用DMSO溶解(100mg/mL),使用时1:10-15(体积比)加入生理盐水混合,得到混浊工作液。

    (2)C57BL/6小鼠,SPF级别,雄性,8‑9周龄。小鼠脱毛。

    (3)按照60mg/kg的注射剂量,对8‑9周龄、体重25g小鼠,模型组每天持续腹腔注射200uL工作液,时间持续2‑3个星期;对照组腹腔注射200uL生理盐水

    (4)观察小鼠毛发生长记录,实验结果见下表和图片。

     对照组Cabozantinib模型组
    注射10天毛发稀疏毛发稀疏
    注射17天黑色毛发开始长出长出白色毛发
    注射24天黑发亮丽白发茂密,毛发长度与对照组无异

    10天

    17天


24天
参考文献

[1]刘学.生发,乌发中草药复方的筛选及其药效学研究[J].[2024-04-17].

[2]邓智利,徐伞,吴峥.一种诱导白发模型的方法:CN202210161963.4[P].CN202210161963.4[2024-04-17].

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